將兔仰臥固定在手術(shù)臺上，把左側(cè)胸部相當于心臟的部位的被毛剪去，用碘伏、酒精消毒皮膚。實驗者用左手觸摸左側(cè)第3-4肋間，選擇心跳最明顯處作穿刺。一般由胸骨左緣外3mm處將注射針頭插入第三肋間隙。穿刺時最好用左手觸診心跳，在觸診的配合下穿刺。 

經(jīng)6-7天后，可以重復進行心臟穿刺術(shù)。家兔一次可采取全血量的1/6-1/5。